Bestimmung des Adrenocorticotropen
Hormons
(ACTH) beim Hund
Präanalytik-Set für Blutabnahme und Plasma-Versand
Notwendigkeit der präanalytischen Stabilisierung
Das canine Proteohormon ACTH ist im Serum und auch im EDTA-Plasma aufgrund
seiner hohen Empfindlichkeit gegenüber Eiweiß-abbauenden
Enzymen nicht stabil. Schon eine Lagerung von wenigen Stunden bei Raumtemperatur
führt zu einem so starken Abbau der immunologisch bestimmbaren
ACTH-Konzentration, dass eine unter nicht optimierten präanalytischen
Bedingungen durchgeführte ACTH-Bestimmung wertlos ist.
Um diagnostisch verwertbare Resultate ermitteln zu können, muss
entweder das aus EDTA-Blut sofort gewonnene EDTA-Plasma direkt bei –20°C
eingefroren, auf Trockeneis verschickt und bis zur Messung gefroren
gelagert werden, oder das ACTH muss durch Zugabe geeigneter Hemmstoffe
vor dem Abbau geschützt werden,
Aus Gründen der besseren Praktikabilität haben wir uns für
den 2. Weg entschieden und ein Inhibitor-Cocktail entwickelt, das in
den EDTA-Mikrogefäßen mit vorgelegt ist (sog. ACTHstab-Mikrogefäß).
Die ACTH-Konzentration in dem hieraus gewonnenen und stabilisierten
Plasma sinkt innerhalb von ca. 24 Stunden um durchschnittlich weniger
wie 10% ab, so dass ein normaler Postversand der Probe in unser Labor
zur ACTH-Bestimmung möglich ist.
Literatur
Schwedes, C., Müller, W.: Bestimmung des endogenen ACTH beim Hund,
Tierärztl. Prax. 2000; 28: 65-70
Lagerung und Vorbereitung des ACTHstab-Mikrogefäßes
Bis zum Gebrauch bitte unbedingt bei -20°C einfrieren, vor Verwendung
auftauen und die enthaltene Lösung auf den Gefäßboden
»schütteln«, Haltbarkeit (bei -20°C): 12 Monate
(Etikett gibt Herstellungsmonat an).
Durchführung der Blutabnahme und Plasmagewinnung
Abnahme von 1,3 ml Blut in das ACTHstab-Mikrogefäß (also
nicht ganz auffüllen, sondern nur bis zur Marke 1.3 !) und nach
Festschrauben des Deckels sofort 3 x über Kopf mischen. Anschließend
sofort bei 3000-4000 g für 5 Minuten zentrifugieren (entsprechend
ca. 6000 UPM bei kleineren Praxis-Zentrifugen) und den Plasma-Überstand
(ca. 0.5 ml) mit einer Transferpipette in ein neutrales Schraub-Mikrogefäß
überführen. Dieses in dem ebenfalls beiliegenden Schutzgefäß
an die Postfachadresse versenden.
 Endogenes
ACTH:
EDTA-Plasma, stabilisiert in speziellen ALOMED-Stabilisatorröhrchen
mit ACTH-Präanalytik-Set. bestehend aus:
- 2 ACTHstab-Röhrchen im Schutzgefäß
- 2 Transferpipetten
- 2 Versandgefäße im Schutzgefäß
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